分享好友 检验技术首页 频道列表

淫羊藿含量测定方法(淫羊藿苷)

2007-05-14 00:005980


    淫羊藿为小檗科植物淫羊藿Epimedium brevicornum Maxim、箭叶淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb. Et Zucc.) Maxim、柔毛淫羊藿Epimedium pubescens Maxim、巫山淫羊藿Epimedium wushanense T.S.Ying或朝鲜淫羊藿Epimedium koreanum Nakai的干燥地上部分。2005版《中国药典》一部收载的含量测定方法,一要是采用紫外分光度法测定总黄酮的含量,二是采用高效液相色谱法测定其淫羊藿苷的含量。有关淫羊藿及其制剂中淫羊藿苷的含量测定方法主要有高效液相色谱法、薄层扫描法等。

    一、高效液相色谱法

    2005版《中国药典》淫羊藿含量测定项下:

    色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(30:70)为流动相;检测波长为207nm。理论板数按淫羊藿苷峰计算应不得低于1500。

    供试品溶液的制备:取本品叶片粉末约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入稀乙醇20m,称定重量,超声处理1小时,放冷,再称定重量,用稀乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

    文献报道的HPLC法主要的流动相系统有:

    A:乙腈-水

    ① Waters 515 高效液相色谱仪(Waters 公司);metachem Kromasil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(26:74);检测波长270nm;柱温35℃。

    ②Angilen 1100 液相色谱仪;色谱柱Nova-pak250mm×4.6mm, 10μm)C18柱;乙腈-水(26:74)为流动相;检测波长为270nm。

    ③HP1100型高效液相色谱仪(美国);色谱柱为C18柱(4.6mm×250mm),大连依利特科学仪器有限公司提供;流动相:乙腈-水(30:70);检测波长270nm;柱温室温。

    ④岛津LC-2010高效液相色谱仪;C18反相柱(150mm×4.6mm,岛津公司);柱温40℃;流动相:乙腈-水(25:75);检测波长270nm。

    ⑤Agilent 1100 series 高效液相色谱仪;ApolloC18 ( 250×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(26:74);柱温室温;检测波长270nm。

    B:乙腈-磷酸溶液:

    ①Waters 高效液相色谱仪;YWG-C18柱(4.6mm×150mm,10μm ,北京分析仪器厂);流动相乙腈-0.05%磷酸溶液(33:67);检测波长270nm;柱温室温。

    ②美国SSI PC2002 高效液相色谱仪;色谱柱Diamonsil C18 (4.6×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(用磷酸调pH值至3.0)(30:70);柱温35℃;检测波长270nm。

    ③SP-1000高效液相色谱仪;色谱柱ODS-C18 (4.6mm×200mm, 5μm);流动相0.075mol/L磷酸溶液-乙腈(用三乙醇胺调节pH值为6.6)(74:26);检测波长270nm;柱温37℃。

    C:甲醇-醋酸溶液:

    ①日本岛津SPD210A 高效液相色谱仪;ODS柱,10μm,250mm×4mm。流动相:甲醇-水-冰乙酸(60:40:0.5);柱温30℃;检测波长270nm。

    ②P200 Ⅱ型高效液相色谱仪;色谱柱为Hypersil ODS2 (250mm×4.6mm,5μm,大连依利特科学仪器有限公司);流动相为乙腈-0.4%醋酸水溶液(25:75);检测波长为270nm;柱温为室温。

    样品溶液一般以甲醇、稀乙醇为提取溶剂,净化处理一般用聚酰胺柱或C18小柱处理;也有用正丁醇-碳酸氢钠、乙醚-醋酸乙酯等试剂萃取。

    另外,韩海建立复方骨宝片中有效成分淫羊藿苷含量的高效液相色谱测定法。采用Shimazdu 高效液相色谱仪;色谱柱Shimpack ODS (4.6mm×250mm, 5Lm);流动相为乙腈-0.02 mol/L磷酸二氢钠溶液(32:68);检测波长为254nm;柱温30℃。

    二、薄层扫描法

    以薄层扫描法测定淫羊藿苷含量时,常用的薄层展开剂为醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水系统。如:胡润淮等建立薄层扫描法测定复方仙灵脾注射液中淫羊藿苷含量的方法。采用CS-9301 型双波长薄层扫描仪(岛津)。薄层层析条件:硅胶GF254板;展开剂:醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(10∶1∶1∶1)。薄层扫描条件:采用反射法单波长锯齿扫描法,狭缝为1.2mm×1.2mm,线性参数SX =7,扫描宽度为14mm,测定波长为λs=272nm。供试品溶液的制备:用移液管吸取复方仙灵脾注射液5ml,置分液漏斗中,先用0.1mol/LNaOH饱和过的正丁醇萃取3次(10,15,20ml),弃去碱液,合并正丁醇层,再用正丁醇饱和过的0.1mol/LNaOH溶液洗涤3 次(15,20,20ml),弃去碱液,合并正丁醇层,置水浴上蒸干,残渣以水7ml 溶解,置于已处理好的大孔吸附树脂层析柱(1cm ×10cm) 上,依次用蒸馏水、20%乙醇、70%乙醇进行洗脱,洗脱液体积均为100ml ,流速为5ml/min。收集70%乙醇洗脱液,回收乙醇后,置于浴上蒸干,残渣用少量甲醇溶解,移至5ml 容量瓶中,用甲醇定容至刻度。

    三、其它

    杨广德等建立了薄层色谱-荧光分光光度法测定淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量。采用RF-540 型荧光分光光度计(日本岛津);硅胶G硅胶G加0.1mol/L Na2HPO4的羧甲基纤维素钠溶液自制板;以醋酸丁酯-甲酸-水(1.3:1:1)在10℃以下放置后的上层溶液作为展开剂;显色剂:10% AlCl3甲醇溶液;在Ex=430nm,Em =480nm条件下测定荧光强度。药材用70%乙醇水浴回流提取。

    张明昶等采用一阶导数光谱法测定骨松宝颗粒中淫藿苷类化合物的含量。采用UV-250IPC紫外可见分光光度计(日本岛津)。样品供试液制备方法:骨松宝颗粒→除去包装→加入70%乙醇,60℃水浴中加热提取→用60℃水超声振荡提取→静置过夜→用70%乙醇补足重量→上取聚酰胺柱→先用30ml蒸馏水洗脱,弃去洗脱液→再用70%乙醇洗脱,收集乙醇液,定容于50ml 的容量瓶中,即为样品供试液。在200~400nm范围内自动扫描(△λ= 2nm),以一阶导数峰~谷法(262~276nm) 的振幅值(D)为定量依据测定含量。



反对 0
举报 0
收藏 0
打赏 0
食品中多元素测定检测方法电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)
重金属污染已经成为当今影响人体健康的一个重要污染源,因此如何检测重金属已经成为了一个非常重要课题,下面小编根据国标以及自

2020-01-06349

植物油怎么挑选?看看食品检验专家的介绍!
植物油是做饭、炒菜必备品,不仅关系到菜的色泽、口味,更关系到大众的健康。市场上花生油、大豆油、色拉油等很多种类,面对琳琅

2019-10-21561

Lowry–Folin法测定液体样品中蛋白质含量
  一、 实验目的1、 了解测定蛋白质的常用方法2、 掌握蛋白质含量测定的经典LowryFolin法。二、 实验原理在碱性溶液中,蛋白质

2013-09-10551

牛乳中蛋白质的提取与鉴定
一、目的学习从牛乳中制备酪蛋白的原理和方法。二、原理牛乳和羊乳中含丰富的蛋白质,其中主要是酪蛋白。酪蛋白在羊乳罩中约占总

2013-08-29761

植物可溶性糖含量的测定
可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖,是植物品质的重要构成性状之一,尤其是以果实为目的产品的果树作物,可溶性糖与酸的含量及其

2013-07-24683

苯酚法测定可溶性糖
【原理】植物体内的可溶性糖主要指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。苯酚法测定可溶性糖的原理是:糖在浓硫酸作用下,脱水生成的糠

2013-07-24372