一、明确盲样检测目标;首先要清楚检测哪类微生物:
1、根据病原菌的致病部位:肠道致病菌、呼吸道致病菌等。
2、何类产品的微生物:食品中微生物、化妆品中微生物、水质中微生物等。
二、审核盲样性状:
根据盲样性状制订检测方案,如:液体、固体、附着于载体上、产品(食品、化妆品、水等)。
混合菌(一般为1~3株菌,不同种类,它们之间为不同比例)还是单一菌?
三、制订检测要点:
1、涂片染色、镜检:
1)、判定染色反应:革兰氏染色、抗酸染色、芽胞染色、鞭毛染色等。
2)、菌体形态:球菌(分散状、成堆状、链状、成双状)、杆菌:(长杆菌、短杆菌、粗杆菌、细杆菌、链杆菌、弯曲杆菌等)。
2、培养:
1)、根据作业指导书,选择分离培养用培养基及增菌培养用培养基,从增菌培养管中挑取增菌液,进行增菌及分离培养。
2)、根据盲样检测目标、盲样性状、染色镜检等信息,选择分离培养用培养基及增菌培养用培养基,进行增菌及分离培养。
3、挑取可疑菌落进行纯培养:
参照从染色镜检的信息、选择菌落等,从培养基上选择不同菌落形态、色泽、光滑、湿润程度、边缘状态等。进行纯培养。
4、生物化学试验:
根据菌落特点、染色镜检等信息,选择生物化学反应试验。
如:可疑为肠道致病菌,选择三糖铁培养基进行初筛,然后进行全面生物化学试验等。
可疑为金黄色葡萄球菌,进行血浆凝固酶试验等。
5、血清学试验:
根据菌落形态、染色镜检、生物化学试验等,选择诊断血清分群、分型。
四、综合分析:
根据菌落形态、染色镜检、血清学试验、生化试验或分子生物学检测等,判定盲样中微生物的种类名称。
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