【微生物】产气荚膜梭菌检验注意事项

 产气荚膜梭菌为人类气性坏疽的主要病原菌。1892年，美国病理学家W.H.韦尔奇等自一尸体分出本菌，因而又称魏氏梭菌。菌体较大，大小为(0.9～1.3)×(3.0～9.0)微米，无鞭毛，有荚膜。芽孢椭圆形,位于次级端。厌氧不严格。菌落直径2～5毫米，在血平板上会出现β溶血环，并出现双溶血带。糖发酵能力强，产酸产气。本菌的特征之一是在牛乳培养基中呈暴烈发酵现象。本菌广泛存在于土壤、 人和动物的肠道以及动物和人类的粪便中，会散发臭味。

长期以来产气荚膜梭菌一直仅被认为是一种创伤感染病原菌，直到1943年，才证实它可经过消化道对人产生危害，为食物中毒病原菌。作为重要的病原菌，在食品及水的微生物检验标准中均有涉及，如GB 4789.13-2012、GB 8538-2016，在微生物实验室产气荚膜梭菌检验实验过程中，应注意以下四点：

1、分离本菌采用TSC琼脂（GB 4789.13-2012），添加样品并倾注培养基后，需注意在培养基凝固后在表面再倾注一层培养基，使得样品完全被培养基覆盖。若产气荚膜梭菌暴露在外界，则可能导致其菌落不显黑色。

 

产气荚膜梭菌ATCC13124

2、进行暴烈牛乳发酵实验时，含铁牛乳培养基只煮沸溶解不灭菌的话，能有效提前暴烈发酵的时间。此外，接种菌液时，菌液浓度需较高，并且接种于培养基中下部，不能接种于培养基表面；因暴烈发酵时培养基会上升，因此培养及表面到试管口应留一定空隙，防止实验过程中培养基溢出。

图左为灭菌培养基，右图为未灭菌培养基

3、乳糖明胶在温度较高之时呈现液态，此时接种接种FTG培养物至乳糖明胶生化管当中即可。记得是在培养结束后将乳糖明胶放置4度1小时，再观察培养基的液化情况，而不是在培养基结束后立刻观察。

阳性 阴性

4、缓冲动力硝酸盐实验，滴加硝酸盐试剂甲、乙液以检查亚硝酸盐的存在。15 min内出现红色者，表明硝酸盐被还原为亚硝酸盐；如果不出现颜色变化，则加少许锌粉，放置10 min，出现红色者，表明该菌株不能还原硝酸盐。如果没有出现颜色，说明原菌已经将硝酸盐还原至氮气甚至铵盐。

产气荚膜梭菌ATCC13124