分享好友 检验技术首页 频道列表

手把手教你霉菌斜面转接培养

2022-08-24 00:008100
 操作步骤:

一、开箱检查:

打开包装箱,查看斜面是否破损,菌株编号与说明书是否一致。

二、实验准备:

仔细阅读菌株说明书,准备2个新鲜平板或斜面。

三、器材灭菌:

斜面试管表面消毒后,转移至生物安全柜中,管口灼烧灭菌冷却备用。接种锄和接种铲在酒精灯外焰翻转灼烧灭菌3-5分钟,冷却备用,冷却后用接种锄在斜面上相距0.5cm处切两条平行线(与试管垂直)。

四、切分斜面:

换接种铲在两条平行线之间相距0.5cm处切两条平行线(与试管平行),形成0.5cm*0.5cm的小正方形菌块。

五、霉菌转接:

用接种铲挑取菌块平放到平板或斜面(固体琼脂表面)上(菌块正面朝上)。转接多个平板或斜面,重复以上操作即可。

六、完成培养:

平板正放,斜面倾斜放置于霉菌培养箱中培养。(参照菌种说明书上的培养条件设置温度)

(1) 实验材料

根霉,毛霉,黑曲霉,青霉,土豆琼脂培养基,培养皿,载玻片,盖玻片,镊子,显微镜,小刀,U形管等。

(2) 实验步骤 

1、配置培养基:根据原料用量配置土豆培养基。配置时,先急火煮沸,在温火加热20min,若有浑浊出现,则需过滤,然后定容。包扎土豆培养基,甘油等其他用品。灭菌后取出备用2、培养小室准备及灭菌 在培养皿底部铺一张略小于皿底的圆形滤纸片,滤纸片上依次放上“U”形载玻片搁架、载玻片、盖玻片-四片,盖上皿盖,牛皮纸包扎,于恒温干燥箱中121℃灭菌30min烘干备用;

 2、琼脂薄片制作:

a) 将稍微冷却的培养基,倒在培养皿 中,做成薄平板。培养基应该要倒 得薄而均匀。注意无菌操作。

b) 用解剖刀将琼脂薄平板切成边长不大于1cm的琼脂薄片

c) 用解剖刀将琼脂薄片移至小室载玻片上(一个载玻片上方两块薄片)

3、取菌接种:用接种环挑取少量待观察的霉菌孢子(霉菌菌种的表面轻轻刮取即可),接种于固体培养基边缘,以便于霉菌生长。接种时只要将带菌的接种环在载玻片上轻轻碰几下即可。接种量要少,以免培养后菌丝过于稠密而影响观察。

4、加盖玻片:用无菌镊子将皿内的盖玻片盖在琼脂薄层上,用镊子轻压盖玻片,使盖玻片和载玻片之间的距离相当接近,但不能压扁。盖玻片不能紧贴载玻片,要彼此留有小缝隙,一是为了通气,二是使各部分结构平行排列,易于观察。

5、倒保湿剂:每皿倒入约2-3mL 20%的经灭菌处理的甘油,使皿内滤纸完全湿润,以保持皿内湿度,盖上皿盖。制成载玻片湿室。
6、正置培养:将平皿置于27℃霉菌培养箱中培养一周。

7、观察: 将培养好的载玻片取出,置于显微镜下直接观察。

(3)实验结果及分析

实验结果

1.根霉:菌丝无隔,有假根、匍匐菌丝。假根着生处有向上直立的孢囊梗,其顶端膨大成孢子囊,底部为半球形囊轴。

2.毛霉:孢囊梗直接由菌丝出,顶端为球形孢子囊

3.黑曲霉:菌丝有隔,气生菌丝分化为分生孢子梗(无隔),顶端 膨胀为球状顶囊。

4.青霉:菌丝有隔,分生孢子梗顶端不膨大,无顶囊,多次分枝成几轮小梗,小梗顶端长孢子。分生孢子梗呈扫帚状。

如何让霉菌产孢子?

一般微生物都会在逆境下产孢子,比如低温、紫外照射等恶劣的生存条件,有的情况下,阳光照射也能促使产孢。不同的菌的产孢条件还不太一样,要因菌而异,和培养基也有关。可以找找相关资料查查产孢培养基,可以试试水琼脂培养基(直接在水中加琼脂、无其他营养物质)。





反对 0
举报 0
收藏 0
打赏 0
什么是食品安全指标
 近日,在与朋友们讨论标明执行推荐性标准的食品抽检不合格的处理时,有人提出应当适用《食品安全法实施条例》第七十四条,……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

2023-06-25787

检测报告要求
1信息完整、一致:原始记录要具有原始性、可复现性、追溯性(特别是检测方法、规范),对检测条件有具体要求时应详细记录。有些信……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

2023-06-25525

食品中常见的微生物汇总
假单胞菌属:革兰氏阴性、极生鞭毛、可运动、不生芽孢、杆状,新鲜食品中的优势菌,常存在于土壤和水中,广泛分布在食品中。另外……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

2023-06-25917

实验室温湿度要求
 在实验室的监控项目中,不同实验室对温湿度都有要求,大部分实验都是在明确的温湿度环境中展开。在医药、生化、仪器校准、……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

2023-06-25934

样品管理员需要授权?
 样品管理员要不要授权?1正方观点:不需要授权依据CNAS-CL01条款6.2.6 实验室应授权人员从事特定的实验室活动,包括但……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

2023-06-25685

高压蒸汽灭菌锅使用标准操作程序
 高压灭菌锅在日常使用和维护中有许多地方是需要重视的,这样才能更好的保证人员安全及设备的正常运行,今天小编就为您分享……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

2023-06-25499

浅谈关于天平内放置干燥剂的问题
万分之一天平防尘罩里面到底要不要防干燥剂?天平生产厂家都不建议放?因为干燥剂的存在会引起罩内空气对流进而影响称量, 另外干……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

2023-06-25485

超净工作台失火对策
 1管理要求(1)超净工作台由专人管理,定期清洁过滤网。(2)使用人员应保持超净工作台的整洁卫生。(3)微生物实验与植物……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

2023-06-25343