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培养基配制步骤!

2023-01-10 00:003900
 11、计算称量


根据待检样品属性计算出所需的不同培养基的体积,根据说明书进行准确称量;电子天平需开机预热30min后使用,称量过程中手要稳,避免将培养基洒落在天平称量盘中,若洒落,应立即停止称量,使用洁净布擦干粉末,重新调“0”后称量。
2、溶化


对于可溶性淀粉,先用少量冷水调成糊状,再放入沸水中;不易溶解的培养基,先加入少量纯化水振摇溶解后,二次加水配制;需分装的培养基,需完全溶解,含琼脂的培养基需加热融化,完全溶解后,分装至不同容器中进行灭菌。
3、分装


如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中。如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基。分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免引起杂菌污染。装入试管的培养基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定。一般制作斜面培养基时,每只15×150毫米的试管,约装3~4毫升(1/4~1/3试管高度),如制作深层培养基,每只20×220毫米的试管约装12~15毫升。
4、加塞


分装完毕后,需要用硅胶塞堵住管口或瓶口。主要目的是过滤空气,避免污染。不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。塞入管口或瓶口中的硅胶塞,应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿褶皱侵入,塞好后,以手提塞,管、瓶不下落为合适;硅胶塞的2/3应在管内,上端露出少许便于拔取。
5、包扎


塞好塞的试管和锥形瓶应盖上牛皮纸用绳扎紧,同时贴上标签,注明培养基的名称、组别、配制日期后,准备灭菌。
6、灭菌


根据培养基说明书规定的灭菌参数进行灭菌。灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。


 




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