培养基是液体、半固体或固体形式的,含天然或合成成分,用于保证微生物繁殖或保持其活力的物质。培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作的重要环节,培养基自身质量的优劣、保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。
四、培养基的性能测试
1.外观控制
制备好的培养基应有相应的颜色,一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化,是否蒸发/脱水。
2.污染控制
从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试(无菌试验),确定无微生物生长方可使用。
3.性能测试
(1)测试菌株选择 测试菌株是具有其代表种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基最佳性能的一套菌株,应来自国际/国家标准菌种保藏中心ATCC标准菌株,菌株的选择参考卫生行业标准WS/T232-2002《商业性微生物培养基质量检验规程》。
(2) 定量测试方法(改良Miles-Misra法) 测试菌株过夜培养物10倍递增稀释;测试平板和参照平板划分为4个区域并标记;从最高稀释度开始,分别滴一滴稀释液于试验平板和对照平板标记好的区域;将稀释液涂满整个1/4区域,37℃培养18小时;对易计数的区域计数,按公式计算生长率(生长率=待测培养基平板上得到的菌落总数/参考培养基平板上获得的菌落总数)。非选择性培养基上目标菌的生长率应不低于0.7,该类培养基应易于目标菌生长;选择性培养基上目标菌的生长率应不低于0.1。
(3)半定量测试方法(改进的划线法接种法) 平板分ABCD四区,共划16条线,平行线大概相隔0.5cm,每条有菌落生长的划线记作1分,每个仅一半的线有菌落生长记作0.5分,没有菌落生长或生长量少于划线的一半记作0分,分数加起来得到生长指数G。目标菌在培养基上应呈现典型的生长,而非目标菌的生长应部分或全被抑制,目标菌的生长指数G大于6时,培养基可接受。
(4)定性测试方法(平板接种观察法) 用接种环取测试菌培养物,在测试培养基表面划平行直线。按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养,目标菌应呈现良好生长,并有典型的菌落外观、大小和形态,非目标菌应是微弱生长或无生长。
总之,培养基的质量是微生物实验室检测工作的基础,事关检测工作的准确性、可靠性,在微生物实验室检测工作中举足轻重。如果在工作中忽视任何一个环节的质量问题,都将导致检验结果科学性、客观性的偏离。因此,加强培养基的实验室质量控制,认真地做好培养基的质控工作,不断完善和提高培养基的质控水平,才能为微生物检测实验室提供高质量的培养基。
生物发酵罐灭菌效果验证方法(上)
生物发酵罐的灭菌效果验证是确保无菌生产的关键环节,需通过物理、化学和微生物学多维度方法综合评估,具体验证流程和要点如下:……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-07-08695
生物发酵罐灭菌效果验证方法(下)
三、微生物学验证:生物指示剂挑战试验核心目标:通过定量接种耐热微生物孢子,验证灭菌工艺的致死能力(即杀灭对数)。1. 生……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-07-08364
这些误区,正在毁掉你的超净台!
(一) “开着紫外灯操作,边照边灭菌”——大错特错!紫外灯的有效灭菌范围是静止空气,开启时操作会导致人体暴露于紫外线……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-06-27372
标准菌株、工作菌株与质控菌株区别与用途!
标准菌株、工作菌株和质控菌株在微生物学研究和质量控制中扮演不同角色,其核心区别体现在来源、用途、特性稳定性及……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-06-27709
塑料培养皿重复使用可以吗?
塑料培养皿在实验室中广泛应用,因为它们方便、耐用且相对廉价。然而,当涉及到是否可以重复使用塑料培养皿时,需要仔细考……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-06-13882
紫外线灯使用常见错误
紫外线灯(直接照射法)作为一种高效的消毒工具,广泛用于空气和物表消毒。为确保消毒效果和人员安全,使用时需严格遵守相关规范。……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-06-061063
微生物限度检测样品不完全溶解怎么处理
微生物限度检测样品不完全溶解怎么处理?在微生物限度检测中,当遇到样品不完全溶解的情况时,可以采取以下措施来解决:一、样品……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-05-301092
细菌内毒素简介
细菌内毒素各位生物学小伙伴都知道内毒素是革兰氏阴性菌的菌体中存在的毒性物质的总称。是多种革兰氏阴性菌的细胞壁中含有……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-05-23738
实验室微生物菌种分离纯化具体过程
1、用固体培养基分离和纯化单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-05-16846
微生物培养物(混和培养物)分离纯化主要方法介绍
含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(mixed culture)。在针对某些细菌的检测项目里,因为在标样中常常混有多种菌,我们通……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2025-05-09744