【微生物】四种酵母培养基的配方与操作步骤

     摘要：四种酵母培养基的配制方法与原理，主要包括麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的制备原理和方法。 
    本文主要介绍了四种酵母培养基的配制方法与原理，主要包括麦芽汁培养基、马铃薯葡萄糖培养基、豆芽汁葡萄糖培养基和察氏培养基的制备原理和方法。具体如下：
 
    基
 
    本
 
    原
 
    理
 
    麦芽汁培养基和马铃薯葡萄糖培养基被广泛用于培养酵母菌和霉菌。马铃薯葡萄糖培养基有时也可用于培养放线菌。豆芽汁葡萄糖培养基也是培养酵母菌及霉菌的一种优良培养基。察氏培养基主要用于培养霉菌观察形态用。麦芽汁培养基为天然培养基，马铃薯葡萄糖培养基和豆芽汁葡萄糖培养基二者均为半合成培养基，而察氏培养基则为合成培养基。培养基配方中出现的自然pH系指培养基不经酸、碱调节而自然呈现的pH。
 
    实
 
    验
 
    材
 
    料
 
    1)药品
 
    葡萄搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO4·7H2O，FeS04、琼脂。
 
    (2)仪器
 
    天平、高压蒸汽灭菌锅。
 
    (3)玻璃器皿
 
    移液管、试管、锥形瓶、烧杯、量筒、培养皿、玻璃漏斗等。
 
    (4)其他物品
 
    药匙、pH试纸、称量纸、记号笔、棉花、纱布、线绳、塑料试管盖、牛皮纸、报纸、新鲜麦芽汁、黄豆芽、马铃薯等。
 
    实
 
    验
 
    内
 
    容
 
    (一)麦芽汁培养基的配制
 
    1.培养基成分：新鲜麦芽汁一般为10-15波林。
 
    2.配制方法：
 
    (1)用水将大麦或小麦洗净，用水浸泡6-12h，置于15℃阴凉处发芽，上盖纱布，每日早、中、晚淋水一次，待麦芽伸长至麦粒的两倍时，让其停止发芽，晒干或烘干，研磨成麦芽粉，贮存备用。
 
    (2)取一份麦芽粉加四份水，在65℃水浴锅中保温3-4h，使其自行糖化，直至糖化完全(检查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴碘液，如无蓝色出现，即表示糖化完全)。
 
    (3)糖化液用4-6层纱布过滤，滤液如仍混浊，可用鸡蛋清澄清(用一个鸡蛋清，加水20ml，调匀至生泡沫，倒入糖化液中，搅拌煮沸，再过滤)。
 
    (4)用波美比重计检测糖化液中糖浓度，将滤液用水稀释到10-15波林，调pH至6.4。如当地有啤酒厂，可用未经发酵，未加酒花的新鲜麦芽汁，加水稀释到10-15波林后使用。
 
    (5)如配固体麦芽汁培养基时，加入2%琼脂，加热融化，补充失水。
 
    (6)分装、加塞、包扎。
 
    (7)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
 
    (二)马铃薯葡萄糖培养基的配制
 
    1.培养基成分：马铃薯20g、葡萄糖2g、琼脂1.5-2g、水100ml、自然pH
 
    2.配制方法：
 
    (1)配制20%马铃薯浸汁取去皮马铃薯200g，切成小块，加水1000ml。80℃浸泡lh，用纱布过滤，然后补足失水至所需体积。100Pa灭菌20min。即成20%马铃薯浸汁，贮存备用。
 
    (2)配制时，按每100ml马铃薯浸汁加入2g葡萄糖，加热煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化并补足失水。
 
    (3)分装、加塞、包扎。
 
    (4)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
 
    (三)豆芽汁葡萄糟培养基的配制
 
    1.培养基成分：黄豆芽10g、葡萄糖5g、琼脂1.5-2g、水100ml、自然pH
 
    2.配制方法：
 
    (1)称新鲜黄豆芽10g，置于烧杯中，再加入100ml水，小火煮沸30min，用纱布过滤，补足失水，即制成10%豆芽汁。
 
    (2)配制时，按每100ml10%豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2g琼脂，继续加热融化，补足失水。
 
    (3)分装、加塞、包扎。
 
    (4)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
 
    (四)察氏(czapck)培养基的配制
 
    1.培养基成分：蔗糖3g、NaN030.3g、K2HP040.1g、KCl0.05g、MgSO4·7H2O0.05g、FeS040.001g、琼脂1.5-2g、蒸馏水100ml、自然pH
 
    2.配制方法
 
    (1)称量及溶化量取所需水量约2/3左右加入到烧杯中，分别称取蔗糖、NaNO3、K2HP04、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100ml培养基加入1ml0.1%的FeS04溶液。
 
    (2)定容候药品全部溶解后，将溶液倒入量筒中，加水至所需体积。
 
    (3)加琼脂加入所需量琼脂，加热融化，补足失水。
 
    (4)分装、加塞、包扎。
 
    (5)高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min。
 
    注
 
    意
 
    事
 
    项
 
    这四种培养基的配制无需用酸或者碱调节pH，灭菌20分钟足够了，时间过长容易把培养基成分破坏掉，太短了容易造成污染。