PCR | 条带出现拖尾或非特异性扩增如何解决?
1.非特异性扩增带PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致,或大或小,或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-23752
荧光定量PCR实验中使用的对照分析-空白对照
空白对照(Blank control)(1)无模板空白对照NTC是指不含有模板(阳性模板或者阴性模板)的对照。目前的试剂盒的NC一般都是水或……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-18379
荧光定量PCR实验中使用的对照分析-核酸提取对照、反转录对照
4、核酸提取对照可以使用内参基因,假病毒混合基质,灭活病毒混合基质来监控提取到扩增的流程。5、反转录对照(RT control)可以……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-14890
荧光定量PCR实验中使用的对照分析-内标
3.内标(Internal Control,IC)内标是指在同一反应管中与靶序列共同扩增的一段非靶序列分子。内标有两种形式,一种是使用天然样……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-121048
- 荧光定量PCR实验中使用的对照分析-扩增对照
0评论2024-09-11
荧光定量PCR实验中使用的对照分析-阳性对照和阴性对照
荧光定量PCR(Real-time PCR),是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-10772
PCR反应条件的优化
PCR反应条件包括温度、时间和循环次数。基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法,双链DN……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-09581
ELISA试剂盒实验包被问题解答(二)
二、包被用抗原天然抗原、重组抗原和合成多肽抗原三大类。合成多肽抗原是抗原决定簇的氨基酸序列人工合成的多肽片段。一般只含有……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-06291
ELISA试剂盒实验包被问题解答(一)
在使用ELISA试剂盒进行实验的时候,需要注意很多问题,比如温育、显色、包被等问题。其中,包被是要特别注意的一个问题,直……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-05734
如何去除融解曲线的杂峰
① 引物:如果引物设计不优,如引物设计软件得出的引物评分较低、引物扩增效率不满足90-110%,主要原因可能是引物本身质量不佳导……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-09-02409
离心管盒和冰盒的区别
在实验室的日常工作中,离心管盒与冰盒是两种看似简单却功能各异的工具,它们各自扮演着的角色。了解它们之间的区别,不仅……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-28286
提高RT-PCR反应体系的灵敏度方式解读(三)
6、小量RNA检测方法的提高当仅有小量RNA时,RT-PCR尤其具有挑战性。在RNA分离过程中加入的作为载体的糖元有助于增加小量样……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-26952
提高RT-PCR反应体系的灵敏度方式解读(二)
3、提高逆转录保温温度较高的保温温度有助于RNA二结构的打开,增加了反应的产量。对于多数RNA模板,在没有缓冲液或盐的条件下,将……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-22612
提高RT-PCR反应体系的灵敏度方式解读(一)
1、分离高质量RNA成功的cDNA合成来自高质量的RNA。高质量的RNA应保-证全长并且不含逆转录酶的抑制剂如EDTA或SDS等,以及尽可能减……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-20569
PCR污染该如何避免?
进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。1.划分操作区:目前,普……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-19485
PCR反应扩增产物平端连接法
实验原理:平头连接是将制备好的平头载体和补平或削平的PCR产物直接进行连接。载体可用EcoR V或Sma I切成平头;PCR产物纯化后,可……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-16464
实时荧光定量 PCR 引物和探针的储存
聚合酶链式反应 (PCR) 是分子生物学领域功能强大的技术之一。实时荧光定量PCR 是在标准 PCR 技术基础上演变而成,常用于定量样本……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-13993
保持引物和探针的稳定性的关键点
长期保持引物和探针的稳定性关键有四点:(1)低压冻干的引物在储存时间和温度方面具有更好的灵活性。引物一旦重新溶解,即应置于……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-12712
衣原体不同的检测方法及优缺点(五)
5. 细胞学检测法:通过显微镜观察样品中的细胞形态和结构,检测是否存在衣原体感染的细胞。衣原体的细胞学检测法是通过显微镜观察……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-12329
衣原体不同的检测方法及优缺点(四)
4. 原位杂交法:利用特异性探针与衣原体DNA结合的原理,通过荧光或放射性标记的探针检测样品中的衣原体。优点:(1)可以直接观察……(世界食品网-www.shijieshipin.com)
2024-08-091067