HPLC的酸清洗和钝化！

以下应用需要在使用前做磷酸清洗和硝酸钝化，包括：

•所有的氨基酸分析系统；

•所有包含电化学检测器的系统；

•所有要分析无机阳离子，包括过渡金属的系统；

•所有利用柱后添加衍生试剂或络合样品组分的系统。

以下应用需要在使用前只做磷酸清洗，包括：

•所有常规用途的、可能在低pH环境下在低紫外检测波长下运行的HPLC系统；

•所有需要高灵敏度性能的梯度紫外检测系统。

首先，摘下色谱柱，用两通或接头取代色谱柱。在实行这一清洗步骤时，如果有可能选择监测的紫外波长为：254nm。通过软件或移去电缆的方式取消紫外检测器的自动回零功能。

1、用甲醇彻底冲洗系统，以等比例方式通过泵的所有管路。

2、用水彻底冲洗系统，以等比例方式通过泵的所有管路。

3、以等比例方式通过泵的所有管路导入～30%v/v磷酸水溶液。以1mL/min流速洗大约一个小时。在冲洗期间活动所有的阀，包括：参比阀、进样阀及旁路阀等等。

4.用水彻底冲洗所有管路和系统。

必要时用6N硝酸(HN03)重复以上步骤。否则，跳到第7步。注意：硝酸是一个强紫外吸收溶液。除非绝对需要，不要做钝化程序。

5.以等比例方式通过泵的所有管路导人6N硝酸水溶液(大约是40%)。以1mL/min流速洗大约一个小时。

6.用水彻底冲洗系统，仔细检查是否有任何渗漏，在冲洗期间反复活动所有的阀，包括：参比阀、进样阀及旁路阀等等。

注意：如果你要用低于270nm的紫外波长作检测，则需要更大量水的清洗过程，不断的换新鲜水并活动各个阀(冲洗进样器，等)以便从系统中除去所有的痕量硝酸根离子。硝酸清洗后经常在几天之内都会观察到在低紫外波长下有负的基线漂移。勤换水和有耐心是尽快消除紫外本底的关键。

7.返回到甲醇洗，然后继续用实验所需的溶剂冲洗。