浅谈实时荧光PCR仪

PCR中文翻译为聚合酶链式反应。自1985年PCR技术发明以来，技术发展已非常成熟了，PCR仪主要可以划分为三类，即：常规PCR仪、实时荧光定量PCR仪、数字PCR仪。
  我们今天主要讲实时荧光PCR仪。

PCR技术在近30年的不断发展创新中,最受瞩目的当属荧光实时定量PCR技术(real-time quantitative PCR,或qPCR)。

定量PCR技术真正实现了PCR从定性到定量的飞跃,通过对PCR过程的实时监控,专一、灵敏快速、可重复地精确定量起始模板浓度,已经在科研和临床诊断领域得到了越来越广泛的应用。

PCR的工作原理是变性、退火、延伸三个步骤。

而对于实时荧光PCR仪的工作原理展开来讲就是：将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后，完成高温变性、低温复性、适温延伸的热循环，并遵守聚合酶链反应规律，与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断，荧光素游离于反应体系中，在特定光激发下发出荧光；随着循环次数的增加，被扩增的目的基因片段呈指数规律增长，通过实时检测与之对应的随扩增而变化荧光信号强度，求得Ct值（也就是，循环阈值，即：每个反应管内的荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数），同时利用数个已知模板浓度的标准品作对照，即可得出待测标本目的基因的拷贝数。

这么讲可能你还不能完全理解，那你可以这么去理解，一个实时荧光定量PCR仪，最关键的是两大系统，一个光电系统，一个温控系统。光电系统是用来进行光电信号收集和转换的，温控系统是用来维持核酸扩增所需对应温度条件的。最后电脑自带软件系统会通过相关关系方程式换算出临床定量结果。

关于实时荧光PCR仪的厂家主要如下：

进口厂家有罗氏诊断、美国伯乐、美国ABI（ABI已经被赛默飞收购）。

国产老牌厂家主要是：上海宏石、杭州博日、西安天隆。