4%组织细胞固定液的的使用

固定的目的在于保存细胞和组织的原有形态结构，固定剂能阻止内源性溶酶体酶对自身组织和细胞的自溶、抑制细菌和霉菌的生长。固定液分为醛类固定液、汞类固定液、醇类固定液、氧化剂类固定液、盐类固定液等，较为常用的是醛类中的福尔马林、醇类中的乙醇。

4%组织细胞固定液(4% PFA，RNase free)主要由优质PFA、磷酸盐、DEPC处理水组成，pH为7.4，适合于绝大多数组织和细胞的固定，尤其适用于与 RNA 有关实验，它能较好的保护组织和细胞的形态结构以及 RNA。

使用说明：

1、一般组织固定时间控制在 4～12h，大标本应适当延长固定时间，培养细胞或细胞爬片固定时间控制在 10～15min，特殊情况除外。

注意事项：

1. 实验过程中应穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 该固定液无法高压灭菌，所以无法做到的 RNase free，操作时请注意该细节。

3. 4%组织细胞固定液(4% PFA，RNase free)有一定刺激性和腐蚀性。一经开启，储存过久固定效果易下降。

4. 避免过度延长固定时间，否则引起生物大分子过度交联。取材厚度不同，固定时间也不同。

5. 固定液的容量应足够，一般固定液与组织块的体积比率应大于10:1。

6. 温度对固定的影响很明显，提高温度可以加速固定作用，但温度不宜过高。

7. 取出新鲜组织后，应及时固定，无法及时固定时，应保存于生理盐水中及时送检。