做保健食品研发、申报，毒理学试验是绕不开的关键环节——它直接决定产品能不能过审、安不安全，也是监管核查的重点。
很多朋友在实操中经常懵：都需要做哪些毒理试验？什么样的产品能免做毒理？实验动物怎么选才合规？样品预处理有哪些红线？
这篇文章就将上述问题一次性讲清，可以直接拿来使用！
NO.1
毒理试验的选择
《保健食品及其原料安全性毒理学检验与评价技术指导原则（2020年版）》、《保健食品注册审评审批工作细则（2016年版）》均有说明：
1 保健食品原料
需要开展安全性毒理学检验与评价的保健食品原料，其试验的选择应参照新食品原料毒理学评价有关要求进行。
2 保健食品
保健食品一般应进行急性经口毒性试验、三项遗传毒性试验和28天经口毒性试验。根据实验结果和目标人群决定是否增加90天经口毒性试验、致畸试验和生殖毒性试验、慢性毒性和致癌试验及毒物动力学试验。
3 哪些产品可免做毒理学试验？
（1）以普通食品、新食品原料、按照传统既是食品又是中药材的物质为原料，采用水提等传统食品生产工艺生产、食用方法与传统食用方法相同，且原料推荐食用量为常规用量或符合国家相关食品用量规定的保健食品，注册申请人可以申请免于提供产品的安全性评价试验材料；
（2）营养素补充剂类保健食品，使用《营养素补充剂申报与审评规定（试行）》表2（维生素、矿物质化合物名单）以内的物品，其生产原料、工艺和质量标准符合国家有关规定的，不要求进行毒理学安全性试验。
4 特殊情况
采用导致物质基础发生重大改变等非传统工艺生产的保健食品，应进行急性经口毒性试验、三项遗传毒性试验、90天经口毒性试验和致畸试验，必要时开展其他毒性试验。
NO.2
实验动物怎么选？
1 选择实验动物的一般原则
常规选择物种的方式是利用两个物种，一种是啮齿类，另一种是非啮齿类。系统毒性研究最常用到的啮齿类是大鼠和小鼠，常用的非啮齿类物种是狗。
表1为对于具体试验所用动物物种的一些常规选择。
表1 对于具体试验所用动物物种的一些常规选择
NO.3
受试物怎么处理？
1 给样剂量的要求
各种动物实验至少应设3个剂量组，另设阴性对照组，必要时可设阳性对照组或空白对照组。
剂量选择应合理，尽可能找出最低有效剂量。在3个剂量组中，其中一个剂量应相当于人体推荐摄入量（折算为每公斤体重的剂量）的5倍（大鼠）或10倍（小鼠）且最高剂量不得超过人体推荐摄入量的30倍（特殊情况除外）受试样品的功能实验剂量必须在毒理学评价确定的安全剂量范围之内。
2 受试物最大容量的要求
实验动物给药途径包括灌胃、皮下、腹腔、皮内、肌内和静脉，不同途径给药量不同，相同给药途径的不同动物品种对药物的耐受量也不同。
常见的不同种类的实验动物一次给药能耐受的最大容量见表2。
表2 一次给药的最大耐受量（ml）
注：小鼠20g，大鼠200g，兔2.5kg，猴3.5kg，犬10kg。
NO.4
样品预处理
原则：尽量模拟人体实际食用方式，不破坏成分、不引入新毒性。
1 常用介质
蒸馏水、食用植物油、淀粉、明胶及羧甲基纤维素等，要求无毒、不与样品反应、稳定。
2 常见样品预处理方式
液体类：受试物浓缩倍数应符合试验要求，按工艺要求。浓缩方法不应破坏其有效成分，常用的有60~70℃减压或常压蒸发、冷冻干燥。
袋泡茶类：处理方法与产品推荐饮用方法相同，推荐用：80~90℃常压用水浸泡30min，水量为受试物的10倍，提取2次，2次提取液合并浓缩至所需浓度，标明该浓缩液与受试物的比例。
含乙醇类：
（1）不需浓缩的受试物：乙醇浓度＜15%直接进行试验；乙醇浓度＞15%乙醇浓度应调至15%。
（2）需浓缩的受试物：乙醇浓度＜15%浓缩后调至原乙醇浓度；乙醇浓度＞15%浓缩后调15%乙醇浓度；在进行乙醇浓度调整时必须用原酒基。
难溶固体类：粉碎、助悬，保证给药均匀。
高膨胀、易结块类：合理控制浓度，避免堵塞灌胃针
拌饲给药类：受试物在饲料中比例一般不超过10%，避免营养失衡所有预处理方法、参数、比例，必须完整写入试验报告。
NO.5
总结
要不要做？看原料、工艺、人群、用量
动物选啥？啮齿类优先大鼠/小鼠，特殊用犬、豚鼠、兔
受试物？和上市产品一致，同批次优先
预处理？模拟食用方式，记录全过程
最终目的？证明产品在推荐剂量下，长期食用安全
日期：2026-04-24
