逆转录酶 M-MLV Reverse Transcriptase(RNase H-)产品简介莫洛尼氏鼠病毒逆转录酶（M-MLV RT）能以单链RNA或DNA为模板，在引物的引发下合成与模板互补的DNA链。本逆转录酶是通过基因重组技术克隆表达的缺失突变型RNase H-的M-MLV反转录酶，RNase H活性缺失，延伸能力强，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。
来源重组蛋白质（E.coli）；纯度>95%，没有检测到其他蛋白酶和核酸酶活力。
活力单位定义以Poly (A)为模板，Oligo (dT)为引物，在37℃条件下，10分钟内催化掺入1 nmol dTTP所需酶量定义为1个活性单位(U)。
应用用于 lst-Strand cDNA 的合成， RT-PCR 反应以及 Real Time RT-PCR 反应等。
储存条件冰袋运输；长期保存-20℃或以下（12个月）； 避免反复冻融，建议分装保存5× M-MLV RT Buffer。
溶液成分| M-MLV RT (RNase H-) 储存液 | 5X M-MLV RT Buffer |
|---|---|
| 20 mM Tris-HCl，pH 7.5 | 250 mM Tris-HCl，pH 8.3 |
| 100 mM NaCl | 250 mM KCl |
| 1 mM EDTA | 20 mM MgCl |
| 5 mM DTT | 50 mM DTT |
| 0.1%(v/v) TritonX-100 | |
| 50%（V / V）Glycerin |
| Template RNA | Total RNA | 1ng-5μg |
|---|---|---|
| poly(A) RNA | 10pg-500ng | |
| Primer | Oligo(dT)18 Primer | 0.5μg(100pmol) |
| Random Primers | 0.2μg(100pmol) | |
| Specific Primer | 10-20pmol | |
| DEPC-treated water | Up to 12.5μl | |
| 5X M-MLV RT Buffer | 4μl |
|---|---|
| dNTP(10mM) | 2μl |
| M-MLV RT (RNase H-)(200U/μL) | 1μl |
| RNase Inhibitor | 0.5μl |
| Total volume | 20μl |
以Random Primers作为反转录引物时应先于25℃，反应10分钟，然后再于42℃条件孵育1小时。 70℃加热15分钟以终止反应。得到cDNA溶液可直接用于2nd-Strand cDNA的合成或PCR扩增。
责权声明：
①本版块的所有文章及图片均为客户自行编辑，其版权为客户所有，客户需保证其编辑的文章及图片均无侵犯任何第三方的合法权益，如被第三方维权，由客户承担全部责任；
② 本网站仅为展示平台，如要转载，请与我网站联系协助获得授权；
③发布内容如有侵权，请及时联系我网站进行删除。
※ 联系电话：400-854-6788
