一、检测原理
本试剂盒采用间接竞争ELISA 方法,样品中游离的黄曲霉毒素M1 与酶标板上固相包被的黄曲霉毒素M1 抗原竞争结合特异性抗体,酶标二抗可与抗体反应,再通过酶的专一性显色剂显色,因为酶可以使无色的显色剂转变成蓝色,终止液的加入可以终止显色,蓝色转变成黄色,吸收值可以在450nm 处进行测定。颜色变化的程度反映样品中黄曲霉毒素M1 的含量。
二、检测范围
本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较,能经济、快速地检测出液态奶、奶粉、酸奶、奶酪等样本中的黄曲霉毒素M1。
样本前处理步骤:
(一)液态奶(含生鲜奶及成品液态奶)
1、取待测样品,3000rmp 室温下离心10min(除去脂肪层);
2、下层500μL 待测样本,加入500μL 液态奶样品稀释液混匀2min;
3、取下层50μL 用于分析。
稀释倍数:2
(二)酸奶
1、称取0.5g 待测样品,加入500μL 酸奶样品稀释液,混匀2min;
2、7000rmp 室温下离心10min
3、取下层50 μL 用于分析。
稀释倍数:2
(三)奶粉
1、称取1 g 样品,加入6mL 乙腈,混匀2min;
2、3000rpm 室温下离心,10min;取上清3ml,50℃氮吹;
3、加入0.5ml 浓缩样品稀释液复溶,再加入0.5ml 正己烷混匀2min,3000rpm 室温下离心,5min; 4、取下层50μL 用于分析。
(四)奶酪
1、取1g 研磨后的奶酪,加入6ml 甲醇,7000rpm 室温下
离心,5min;
2、取下层2ml,60℃氮吹;
3、加入1ml 石油醚,再加入2ml 样品提取液,混匀2min;
4、5000rpm 室温下离心,5min;
5、取下层50 μL 用于分析。
稀释倍数:6
七、酶联免疫检测步骤
测定前须知:
1、 使用之前将所有试剂和需用微孔板回升至室温。
2、 使用之后立即将所有试剂放回2~8 ℃。
3、 在使用中不要让微孔干燥。
4、 在ELISA 分析中的重复性,很大程度上取决于洗板的一致性,正确的洗板操作是ELISA 测定程序中的要点。
5、 在所有恒温孵育过程中,避免光线照射,用盖板膜盖住微孔板。三、交叉反应率: 黄曲霉毒素M1………………………
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