N-glycan analysis Flowchart N-糖链的分析流程上海惠诚生物为Ludger中国区总代理，提供N-糖链分析等糖基化分析产品，包括：糖链释放、多糖标记、纯化柱等，联系电话：18018625233(同微信) QQ：2303607288Ludger为解决现有2AA和2AB标记试剂的毒性作用，了无毒的、以2-甲基吡啶硼烷(2-PB)为还原剂的标记试剂盒，比之前更安全。N-glycan analysis步是酶解多糖释放后用LC-EB10-A6纯化，去除多余的蛋白； 其中可以使用PNGase F 酶【E-PNG01 & E-PNG05】进行酶解。第二步进行标记（2-AB标记试剂盒或者Procainamide 标记试剂盒）；可以分析24个样品，此外还有可以分析96个样品的包装。第三步 用 LC-S-A6 纯化柱进行纯化取出多余的标记试剂；一个set的柱子都是含有6根柱子。第四步进行HPLC/UHPLC/MS/MALDI分析，其中需要用到多糖标准品，Ludger提供2-AB标记，2-AA标记，APTS标记和未标记的多糖分析用标准品，产品线比较齐全，满足多糖分析标准品所需。Ludger的分析方法和试剂/柱子是美国USP推荐使用品牌。 无毒的2-AB多糖标记试剂盒与原有2-AB和2-AA试剂盒区别 其中第二步标记，我们有2-AB和2-AA 多糖标记试剂盒，以及无毒的2-AB 多糖标记试剂盒，此外还有Procainamide 标记试剂盒。下面是他们之间的区别：资料显示，有毒的2AA或2AB是欧美几十年前使用的技术，近几年专家证明有毒的2AA或2AB标记试剂可能影响女性的生育或影响将来所生宝宝的正常发育。因些，英国Ludger生物科技公司特意开发了无毒的2AA（货号：LT-KAA-VP24）和2AB（货号：LT-KAB-VP24）标记。这也是欧美国家目前使用多的标记技术。这两个试剂盒Ludger很早以前就获得。它们采用一种无毒的还原试剂----2-甲基吡啶硼烷(2-PB)，比之前有毒性的氰基氢硼化钠更安全。它们具有以下特点：1、已通过ICHQ2(R1)认证，进行过β因素测试；2、精确度高，相对峰面积超过5%，其CVs是少过5%；相对峰面积低于5%，其CVs是少过8%；3、标记效果比现有有毒性的2-AA标记试剂盒和2-AB试剂盒要好；4、试剂盒含有两个预混合瓶，一瓶是醋酸和DMSO溶液，另一瓶是有2-PB的2-AB或者2-AA标记物，因此标记过程简单。5、2h内完成标记。此外，Ludger的Procainamide Glycan Labeling Kit的敏感性更好，Ludger的科学家对标记效率进行了评估和测试以及改善反应条件使标记效率提高。相比2 AB，普鲁卡因胺标记具有以下特点:● 与(U)HPLC和MS兼容；● 提高低丰度寡糖的鉴定；● 提高质谱离子化效率；● 使得用二级质谱（MS/MS）碎裂测定低丰度的寡糖组分的结构成为可能；适合于用LC-MS分析普鲁卡因胺标记的中性和唾液酸化多糖(使用LudgerTag普鲁卡因胺标记试剂盒，货号# LT-KPROC-24)，它是一个可用于多糖的相对定性和定量分析的单一体系。它可用于以下:1. 生物药物，如：促红细胞生成素，IgG等；2. 生物样品，如唾液酸；3. O-glycan分析。每个试剂盒有两套试剂，每套有3个小瓶。每一个set可以做12个样品，总共可以做24个样品。从样品处理开始，整个分析过程只需要1.5小时。此外，还有V-Tag kit 针对IgG的糖肽的标记和富集试剂盒(可以直接对肽段进行分析），通过（U）HPLC或MALDI质谱分析分析。 上海惠诚生物科技有限公司提供以下糖基释放、标记、纯化和分析用产品，原装进口，联系电话：18018625233(同微信) QQ：2303607288
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