测定方法
试剂盒,通常采用固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)进行测定。具体步骤如下:
标准品稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔,加入不同浓度的标准品。
加样:设空白孔和待测样品孔,加入样品稀释液和待测样品。
温育:用封板膜封板后置于适宜温度(如37℃)温育一定时间(如30分钟)。
洗涤:揭掉封板膜,弃去液体,加入洗涤液洗涤多次。
加酶:每孔加入酶标试剂(空白孔除外)。
再次温育和洗涤:重复温育和洗涤步骤。
显色:加入显色剂A和B,避光显色一定时间(如15分钟)。
终止:加入终止液终止反应。
测定:在酶标仪上,通常选择450nm波长测定各孔的吸光度(OD值)。根据标准品的浓度和对应的OD值绘制标准曲线,然后根据待测样品的OD值在标准曲线上查找对应的浓度。