1 概述
生物安全柜(以下简称BSC)操作使用上的注意事项,包括:如何开关、工具如何分区摆放、运行时如何避免污染。
BSC是一种半密闭的通风设备,它为实验操作者提供洁净空气,并且洁净空气按特定方向持续吹出。
BSC内提供了一个供操作者摆放实验工具和操作的台面,当设备运行时,台面内的空间会持续获得经过过滤的洁净空气;设备不运行时,可关闭台面的玻璃门,并执行紫外照射消毒。
2 分类
BSC根据防护等级可以分为I、II和III三种等级。
I级保护样品无菌,但不保护人员和环境,适用于低至中等风险的实验操作;
II级(A1/A2/B1/B2型)同时保护人员、样品和环境,适用中等至高风险操作,如病原体培养,其中A2和B型可处理挥发性有毒物质;
III级为全密闭,最高防护级别,用于高危病原体(如埃博拉病毒)。
如果我们的课题研究不涉及高风险病原微生物,那么细胞房内一般配备的是II级BSC。
从下方的II级BSC工作原理图可见,细胞房内的空气经过操作台面前端的气孔被吸入BSC内,经过内部管道流通后,到达操作台面上方的HEPA滤膜。经滤膜过滤后的空气从上至下吹送至操作台面。这些吹向台面的洁净空气,当吹过样品和工具之后就不再洁净了,它们会再次被台面前端的气孔回收进入二次循环。这样,就确保了不洁净的空气不会吹出台面进而污染操作者和环境。
所以说,II级BSC能保护样品也能保护人员和环境。
3 如何开关
在每一次实验操作之前,应该先擦拭干净台面,把稍后操作要用的工具按一定规则摆放好,然后关上玻璃门,设置紫外照射30分钟,此时,人应远离BSC等待消毒结束。
消毒结束后,关闭紫外,拉起玻璃门至适当高度(通常设备会有提示限高位置,超出后无法打开风机或报警),然后开灯和打开风机。等待内部气流稳定5-10分钟后,人再坐下来操作。
实验操作结束后,清洁台面,此时仍然应该让风机继续运行5-10分钟,目的是把内部空气完成过滤。
4 如何摆放
操作台面呈矩形,工具摆放时应遵循科学分区原则:
(1)将台面分为洁净区、操作区和污染区;
(2)操作区在中间位置,洁净区和污染区不相邻;
(3)工具应尽量均匀展开,彼此不遮挡。洁净区应摆放样品和一次性耗材,例如吸头、移液管、离心管、培养瓶皿。
操作区是实验操作的区域,中间位置尽量留空,靠内侧的位置可摆放移液器、试剂瓶。
污染区是存放废弃物的地方,可以把废液缸、垃圾桶放在这里,但应尽量靠内侧、靠远端放置(应确保与它们距离最近的瓶皿、设备至少相隔30厘米或以上)。
5 使用注意事项
首先,正式操作时,操作者的手会多次伸入台面,并在里面移动。应注意:
(1)手臂应与台面呈垂直方向伸入;
(2)在内部左右移动时速度不要过快。这样可以尽量降低手臂移动对垂直气流带来的扰动。
其次,台面上的工具会被拿来拿去,要切记:1 工具用完后不要放错区域;2 工具摆放的位置绝对不能挡住进气孔。
第二点的原因是避免工具挡住进气孔,造成污染的空气无法被回收,从而释放到实验室内,同时也会造成外部污染的空气进入BSC时不能全部被吸入进气孔,造成污染台面。