培养基移种方法

一、斜面培养基移种技术
(1)材料
琼脂斜面培养基
经分离培养的平板培养物。
(2)方法
①在琼脂斜面培养基试管上部标明移种的菌名(或编号)、接种日期、接种者的组别及代号。
②左手持长有细菌的平板底，右手持接种环。接种环在火焰上灭菌冷却后，沾取平板划线上发育良好的孤立菌落。把平板放回原处，立即用此手取斜面培养基斜持，用右手小指与手掌夹持棉塞，轻轻转动后拨出棉塞，管口通过火焰灭菌。
③将已沾菌的接种环伸入斜面培养基的管底部的凝固水，沿斜面培养基的表面从底向上划一直线，然后再从底部向上划连续曲折线；也可不划直线只划曲折线。取出接种环，管口通过火焰灭菌，塞好棉塞，放试管架上，接种环火焰灭菌后放下。
向斜面培养基上移种的细菌如果是生长在斜面培养基上的，或是生长在液体培养基中的，则用左手同时斜持菌种管和斜面培养基两个管，右手无名指、小指手掌同时拔起夹持二个棉塞。管口及接种环先经火焰灭菌后，从菌种管取菌立即移种到斜面上，塞好棉塞，接种环火焰灭菌后放下。然后将斜面培养基放37℃恒温箱中培养24h。结果斜面表面形成菌苔。
二、液体培养基移种技术
用于纯种细菌的增菌及观察细菌在液体环境中的生长特征(混浊生长，表面生长或沉淀生长)
(1)材料
肉汤培养基
斜面培养物(大肠埃希菌、化脓性链球菌、枯草芽胞杆菌)
(2)方法
①取接种环在火焰上灼烧灭菌、冷却。
②以“双管移植法”左手持细菌斜面培养物和肉汤培养基两支试管，右手持接种环，按无菌操作法取少量细菌，将沾菌的接种环在斜倾的接近液面的管壁上轻轻涂抹研匀，试管直立使沾附在管壁上的细菌没入液体中，接种后放37℃恒温箱中培养。
(3)结果
①浑浊生长大肠埃希菌菌液呈均匀混浊，管底有少量沉淀。
②沉淀生长化脓性链球菌菌液管底有沉淀，菌液无明显浑浊。
③菌膜生长枯草芽胞杆菌菌液表面形成膜状物。
三、半固体培养基移种技术
用于保存菌种及间接检查细菌有无动力。
(1)材料
半固体培养基。
细菌斜面培养物。
(2)方法
①将接种针经火焰灭菌冷却后，从斜面培养物表面沾取细菌。
②用无菌法穿刺接种，将接种针刺入半固体培养基正中央，深度达距管底0.5cm处停止，然后循原路退出。注意在刺入及拔出时要保持接种针不向穿刺线外摆动。
③试管口通过火焰灭菌，塞上棉塞。接种针经火焰灭菌。培养物放37℃恒温箱中培养。
(3)结果：有动力的细菌呈扩散生长，无动力的细菌沿穿刺线生长。