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V-J琼脂培养基的原理和使用方法

   2024-02-26 青岛高科技工业园海博生物技术有限公司653
核心提示:一、试验原理:本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素;甘露……(世界食品网-www.shijieshipin.com)

一、试验原理:

本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。

明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素;甘露醇为可发酵糖类;酚红为酸碱指示剂;磷酸氢二钾为pH缓冲剂;甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用;较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长,金黄色葡萄球菌可还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):

明胶蛋白胨 

10.0

酵母浸粉

5.0

甘露醇

10.0

酚红

0.025

磷酸氢二钾

5.0

氯化锂

5.0

甘氨酸

10.0

琼脂

16.0

pH 7.2±0.2        25℃

三、试验方法:

1、称取本品61.0 g,加热搅拌溶解于1000 mL蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15min,冷至45-50℃左右时,加入20 mL过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀,倾入无菌平皿。

2、制备质控菌液,接种到培养基上。

3、放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。
四、结果观察与解释

接种以下质控菌株,放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。

质控菌株 菌株编号 接种量 回收率 生长情况 其它特征
金黄色葡萄球菌 ATCC 25923 10-100 ≥70% +++ 黑色菌落,菌落周围黄色
金黄色葡萄球菌 ATCC 6538 10-100 ≥70% +++ 黑色菌落,菌落周围黄色
表皮葡萄球菌 CMCC(B)26069 10-100 ≥70% +++ 黑色菌落,菌落周围黄色
大肠埃希氏菌 ATCC 25922 100-1000 / - 抑制

 

 

 

图1 V-J琼脂培养基微生物质控结果

a:金黄色葡萄球菌ATCC 25923;b:金黄色葡萄球菌ATCC 6538;

c:表皮葡萄球菌CMCC(B)26069;d:大肠埃希氏菌ATCC 25922



 
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