兽药残留是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品(如鸡蛋、奶品、肉品等)中原型药物或其代谢产物，包括与兽药有关的杂质的残留。在动物源性食品中较容易引起兽药残留的药物主要有抗生素类、磺胺类、呋喃类、抗寄生虫类和激素类药物。长期食用兽药残留超标的食品后，当体内蓄积的药物浓度达到一定量时会使人体产生多种急慢性中毒，如氯霉素能导致再生障碍性贫血；四环素类能抑制骨骼和牙齿的发育；磺胺类药物能够破坏人体造血机能等。
逗点生物开发出使用分散固相萃取法检测猪肉中喹诺酮、氯霉素及磺胺类兽药多残留，致力于为客户提供关于兽药多残留检测的有效解决方案。
一、实验目的
本研究利用分散固相萃取（QuEChERS）法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测猪肉中兽药多残留。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。
二、实验目标物恩诺沙星(CAS: 93106-60-6)
马波沙星(CAS: 11550-35-1)
氟苯尼考(CAS: 73231-34-2)
磺胺多辛(CAS: 2447-57-6)
氯霉素(CAS: 56-75-7)
磺胺间二甲氧嘧啶(CAS: 155-91-9)
本方法适用于猪肉中喹诺酮、氯霉素及磺胺类兽药多残留的HPLC检测及确证。
四、实验材料biocomma® Copure® QuEChERS (Cat. No. COQ050050),
biocomma® Copure® QuEChERS (Cat. No. COQ015601)。
1、样品提取
称取经粉碎好的猪肉2.5 g于50 mL QuEChERS提取管中，加4 mL水，涡旋1 min，再加10 mL 1 %乙酸乙腈，涡旋1 min，加入QuEChERS盐包(Cat. No. COQ050050)，用力振摇1 min，4000 r/min离心5 min。上层乙腈层待净化。
2、样品净化
取待净化的上层乙腈层6 mL于15 mL QuEChERS净化管(Cat. No. COQ015601)中，涡旋 1 min，4000 r/min离心5 min，取5 mL乙腈净化层于40 ℃下氮吹至近干，用1 mL溶解液（乙腈：水=2:8）重新溶解，过0.22 μm滤膜，供上机测试。
3、HPLC仪器条件
设备：Waters Alliance 2695
色谱柱：InertSustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 μm)
检测器：Waters 2996 DAD检测器
检测波长：270 nm
流动相：A：0.1 %甲酸水溶液 B：乙腈
洗脱方式：梯度洗脱
表1 流动相梯度洗脱程序
进样体积：20 μL
1、2.0 mg/kg猪肉中兽药多残留的添加回收率结果
表2 2.0 mg/kg猪肉中兽药多残留的添加回收率结果
2、2.0 mg/kg猪肉中兽药多残留检测的液相色谱图
图1 2.0 mg/kg猪肉中兽药多残留检测的液相色谱图
结论：本方法平均回收率为86.6 %，RSD为3.4 %，满足标准要求。
